产品介绍
该萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒是基于报告基因法检测样品中荧光素酶的活性。不同于荧光法(Fluorescence),生物发光(Bioluminescence)依靠酶促反应产生发光信号,无需激发,灵敏度更高,是细胞学分析的重要手段。本试剂盒具备灵活便捷、检测灵敏度高、测定样品线性范围宽等特点。
检测原理
萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)是一种分子量约为61 KD的蛋白,该酶无需表达后修饰,直接具有完全酶活;荧光素酶需要在氧气、ATP和镁离子同时存在的条件下,催化荧光素氧化,生成氧化荧光素,同时产生黄绿色光,且荧光亮度与荧光素酶的量成正比。生物荧光与荧光素酶的启动子活性成比例,间接反映了细胞刺激物的生物学活性。
产品优势
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- 稳定:信号半衰期可达1小时以上
- 安全:无异味,对操作者友好
- 灵敏度:检测窗口值更宽
- 质控:经ICH方法学验证
试剂盒组分
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组分 |
容量/100次 |
容量/1000次 |
储存条件 |
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Bio-Light Firefly Luciferase Assay Buffer |
10 mL |
100 mL |
-30 ~ -15°C或 长期储存≤-70°C |
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Bio-Light Firefly Luciferase Substrate |
1 vial |
1 vial |
运输和保存方法
试剂盒保存于-30 ~ -15°C,长期保存于-70℃。有效期见外包装盒标签。
本试剂盒相关产品已通过底物稳定性试验、精密度试验、准确度试验、线性和批次间稳定性等试验。
FAQ常见问答
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问题 |
现象 |
解决方案 |
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检测没有信号或者检测信号强度低
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荧光素酶检测试剂的低活性或者失效 |
(1) 配制新的底物试剂,未使用完的试剂建议≤ -70℃保存; (2)使用冻存的底物试剂进行检测时,需在25℃条件下避光解冻并平衡至室温,颠倒混匀后使用。 |
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样品含有其他物质 |
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荧光素酶低表达 |
(1)用不同的启动子、效应细胞或者培养条件提高表达; (2)扩大每孔中样品和试剂的体积/浓度。 |
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化学发光检测仪器不灵敏 |
选择对荧光素酶检测灵敏的检测仪器。 |
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部分试剂使用本试剂盒以外的产品替代 |
成套使用试剂盒产品,尽量确保试剂盒处于推荐使用日期内 |
本试剂盒仅用于科研使用,不可用于诊断或治疗应用。